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目前多肽标记及修饰的内容非常多,广泛应用在多肽药物,多肽生物学,多肽抗体以及多肽试剂的研究中。目前应用广泛的有:非放射性核素标记(C13,H2),荧光标记(FAM,FITC),生物素标记,磷酸化修饰等。
1. 非放射性核素标记
目前在非放射性核素标记中,使用广泛的仍然是C13,H2,因为其使用安全,放射性小。现在有比较完全的非放射性标记的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法将标记好的氨基酸直接连接到多肽上。
2. 荧光标记
荧光标记由于没有放射性,实验操作简单。因此,目前在生物学研究中荧光标记应用非常广泛,荧光标记方法与荧光试剂的结构有关系,对于有游离羧基的采用的方法与接肽反应相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法连接。但是对于FITC标记,需要在连接FITC前,增加一个氨基己酸,避免在切割的过程中被TFA切割掉。
3. 生物素标记
生物素-亲合素系统 (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期应用于免疫学,并得到迅速发展的一种新型生物反应放大系统。由于它具有生物素与亲合素之间高度亲和力及多级放大效应,并与荧光素、酶、同位素等免疫标记技术有机地结合,使各种示踪免疫分析的特异性和灵敏度进一步提高。主要有用于标记多肽氨基的生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)和生物素对硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,当然,也可以直接使用生物素也可以标记,因为其结构上有个游离的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法缩合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶剂增加溶解度。
4. 磷酸肽合成
磷酸肽在生命过程中发挥重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Ser,Thr,Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是单苄基磷酸化氨基酸,Tyr也可以直接使用磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的连接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用该方法合成磷酸化也有缺点,特别是在合成多磷酸化多肽或长肽的时候,连接效率低,最后产品纯度很低,对于这种磷酸化多肽,我们考虑采用后磷酸化方法,其合成过程就是在多肽合成结束后,选择性脱去要标记的氨基酸的侧链保护基,对于Tyr,Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应,而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化,采用双苄基亚磷酰胺,四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体,连接到羟基上,随后在过氧酸下氧化生成磷酰基,完成反应。
服务范围:
西安吉诺泰生物科技有限公司为各高校、科研机构提供高质量、高速度的多肽合成服务服务范围:
1)普通线型肽:链长至188个氨基酸,mg至kg级,纯度可达99%以上
2)修饰多肽: 荧光修饰(FITC,FAM等),DNS修饰,生物素(Biotin)标记, 甲基化(侧链或主链),乙酰化(AC),酰胺化,糖基化,脂肪酸修饰(Pal,Myr等),磷酸肽(Ser、Thr、Tyr),环肽(酰胺环、二硫键环),复合抗原肽(MAPS),罗丹明修饰,同位素标记等
3)蛋白偶联(KLH,BSA,OVA)
4)含特殊氨基酸(D型、各种氨基酸衍生物等)
5)不同纯度多肽(脱盐、>70%、75% >80%、85% >90%、>95%、>98%、>99%)
6)目录肽,原料药物肽,美容肽等
发货时间:
1、通常我们在收到订单后交付合成产品的日期安排如下:
50mg以内交货期为 : 1-2周左右
100mg以内交货期为: 2-3周左右
500mg以内交货期为: 3-4周左右
1g-5g以内交货期为: 4-8周左右(视序列而定)
2、如有其它特殊肽段或其它修饰的,请来电垂讯,我们会给予满意答复。
3、合成序列少于6肽的,请按照6肽计算,克级以上视序列而定。
4、报价包括了合成报告、HPLC检测谱图和 MS 图
服务流程:
1) 提供您所需要合成的多肽序列、合成数量和纯度。
2)我们的专业人员对您提供的序列进行可行性分析,设计多肽合成方案,我们的销售人员会在12小时内向您报价,并与你协商价格、包装等相关事宜。
3) 签订多肽合成协议,开始合成多肽。随时与您沟通合成进展,交流多肽合成过程中的任何问题。 注:多肽合成开始日期为公司确认收到预付款后的第一个工作日
4) 多肽发货,包括以下内容:HPLC谱、MS谱、多肽、产品使用说明、产品特性、保质期等。
5)售后服务,如在售后过程中出现任何问题,公司成立的售后服务部会及时倾听您的反馈,发现问题及时处理,日后进行不定期的售后回访,充分保证您的权益。